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2022
11-29都說“實(shí)驗(yàn)虐我千百遍，我待實(shí)驗(yàn)如初戀”，咱科研er早就看淡失敗了，甚至還能從失敗中吸取點(diǎn)小經(jīng)驗(yàn)優(yōu)化下小方案。但是！因?yàn)槲廴径鴮?dǎo)致的實(shí)驗(yàn)失敗，就太讓人頭疼了，浪費(fèi)樣本浪費(fèi)時間精力，甚至還影響健康，屬實(shí)是百害而無一利。這么多污染防不勝防怎么辦？別怕，Bioss實(shí)驗(yàn)室污染清除全套試劑，讓污染無處遁形。1支原體污染支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中較常見污染之一，保守估計常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中有15–35%存在支原體污染。支原體生長緩慢，不會馬上使細(xì)胞死亡，但會影響細(xì)胞內(nèi)的各種參數(shù)，例如部分支原體會...
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11-29背景資料β2微球蛋白(β2Microglobulin，β2-MG)由99個氨基酸組成的內(nèi)源性低分子量血清蛋白，分子質(zhì)量為11.8kDa，由淋巴細(xì)胞、血小板、多形核白細(xì)胞產(chǎn)生。β2-MG是人類白細(xì)胞抗原(HLA)Ⅰ類的β鏈（輕鏈），含有鏈內(nèi)二硫鍵的單個多肽鏈。β2-MG廣泛存在于血漿、尿液、腦脊液、淋巴細(xì)胞及血小板等表面，量極微。正常人中，β2-MG以相對恒定的速度合成，并被釋放到體液內(nèi)，血清β2-MG極易通過腎小球?yàn)V過膜，濾過的β2-MG幾乎被腎近曲小管細(xì)胞重吸收和降解，不會...
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11-29背景資料催乳素(Prolactin，PRL)又叫泌乳素、促乳素，是一種由垂體前葉合成并分泌的多肽類激素，由199個氨基酸殘基組成。PRL在體內(nèi)有多種分子質(zhì)量的存在形式，最常見的為22kDa，還有16kDa等，不同形式的催乳素與不同PRLR（催乳素受體）結(jié)合。PRL的主要作用為促進(jìn)機(jī)體乳腺上皮細(xì)胞的增值和分化，促進(jìn)乳汁合成。一般情況下，健康成年人的血PRL低于25ng/mL，且大多數(shù)會更低，低于20ng/mL。催乳素的分泌受下丘腦的催乳素釋放因子（促甲狀腺激素釋放激素、血管緊張...
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11-29背景資料鐵蛋白(Ferritin，F(xiàn)ER)是機(jī)體內(nèi)貯存鐵和維持細(xì)胞鐵平衡的一種可溶組織蛋白。鐵蛋白由蛋白質(zhì)外殼（去鐵蛋白）和鐵核心組成，去鐵蛋白一般為外徑約12nm，空囊腔徑長約8nm的球形籠狀結(jié)構(gòu)。去鐵蛋白通常由24個亞基組成，每個單位包括兩種亞基：H亞基（重鏈，主要在心臟）和L亞基（輕鏈，主要在肝臟），其中H型亞基(FerritinHeavyChain，F(xiàn)HL)分子量為22kDa，與中和游離鐵及抗炎有關(guān)；L型亞基(FerritinLightChain，F(xiàn)TL)分子量為19...
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11-26生物鏈霉親和素是與親和素(avidin下稱AV)有相似生物學(xué)特性的一種蛋白質(zhì)，是streptomycesavidinii菌的分泌物，其分子量及結(jié)合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似，等電點(diǎn)6.0，非特異性結(jié)合遠(yuǎn)比親和素低。生物鏈霉親和素是四聚體蛋白，大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合，兩者之間的親和力極為強(qiáng)烈，鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)處于10mol/L數(shù)量級，這一性質(zhì)常用于分子生物學(xué)用途。其中一條完整的SA肽鏈中有159個氨基酸殘基...
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11-23His標(biāo)簽抗體是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽，專門設(shè)計用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小，并且較容易分離和純化，His-tag融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢，是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位，以及純化、定性或定量檢測His融合表達(dá)蛋白等。然而，目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多，且價格也十分昂貴。如何選擇合適的His標(biāo)簽抗體...
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11-17某些熒光物質(zhì)在一定條件下，羊源性成分核酸檢測PCR-熒光探針試劑盒既能與抗原或抗體結(jié)合。又不影響抗原與抗體的特異性結(jié)合。用熒光抗原或熒光抗體對待檢標(biāo)本染色后，在熒光顯微鏡下觀察，可看到發(fā)出熒光的抗原抗體復(fù)合物。作為蛋白質(zhì)標(biāo)記用的熒光物質(zhì)需具備如下條件：①有與蛋白質(zhì)分子形成穩(wěn)定共價鍵的化學(xué)基團(tuán)，但不形成有害產(chǎn)物；②熒光效率高，與蛋白質(zhì)結(jié)合的需要量少；③結(jié)合物在一般條件下穩(wěn)定，結(jié)合后又不影響免疫活性；④作為組織學(xué)標(biāo)記，結(jié)合物的熒光必須與組織的自發(fā)熒光有良好的反襯；⑤結(jié)合程序簡單，...
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11-12熒光抗體操作過程為何要避光？(1)生物化學(xué)反應(yīng)需要酶的催化作用，所以熒光素在熒光素酶和ATP等物質(zhì)的參與下可進(jìn)行反應(yīng)發(fā)出熒光.ATP是生命活動能量的直接來源，發(fā)光強(qiáng)度與ATP的含量成正比，所以根據(jù)發(fā)光強(qiáng)度可以計算出生物組織中ATP的含量。(2)影響酶活性的外界因素有溫度和pH，其中維持溶液pH的相對穩(wěn)定時常常使用緩沖液.分光光度計反應(yīng)室內(nèi)發(fā)生的能量轉(zhuǎn)換是ATP中活躍的化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。(3)熒光素酶濃度不同，但發(fā)光強(qiáng)度相同，由于受ATP數(shù)量限制，發(fā)光強(qiáng)度也不再增加。(4)每個...
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